產品介紹:
抗原修復用于甲醛固定的石蠟包埋組織切片。石蠟切片標本用甲醛固定,使得細胞內抗原形成醛鍵、 羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇, 同時蛋白之間發生交聯而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進行免疫組化染色時,需要行抗原修復或暴露,即將固定時分子之間所形成的交聯破壞,而恢復抗原的原有空間形態。
酶消化方法是常用的抗原修復方法之一,常用 0.1%胰蛋白酶和 0.4%胃蛋白酶液。一般說來,胰蛋白酶消化能力較胃蛋白酶弱,主要用于細胞內抗原的消化,胃蛋白酶主要用于細胞間抗原的消化。工作中要認真參照抗體說明書指示進行消化酶的選擇,這樣針對性更強,標記效果更理想。
操作說明:
胰蛋白酶使用前預熱 37℃,切片也預熱 37℃,消化時間約為 5~30 分鐘;胃蛋白酶消化 37℃時間為 30 分鐘。適用于被固定遮避的抗原,其中有:Collagen,Complement,Cytokeratin,C-erB-2,GFAP,LCA,LN 等。
胰蛋白酶處理
1、滴加一滴胰蛋白酶工作液于組織上。
2、室溫或 37℃孵育 20-40 分鐘,孵育時間的長短依福爾馬林固定時間及所測抗原情況而定。
3、蒸餾水沖洗,終止反應。
4、阻斷內源性過氧化物酶。
5、免疫組化染色。
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